MU392A-UC CDX-2 小鼠單克隆抗體用戶指南

一、產(chǎn)品概述

MU392A-UC CDX-2 小鼠單克隆抗體是一款專(zhuān)為科研用途設(shè)計(jì)的高效免疫試劑，由Biogenex公司研發(fā)生產(chǎn)。該抗體通過(guò)雜交瘤技術(shù)制備，針對(duì)CDX2（Caudal Type Homeobox 2）蛋白設(shè)計(jì)，能夠特異性識(shí)別并結(jié)合CDX2抗原，廣泛應(yīng)用于腸道上皮細(xì)胞分化、增殖及腫瘤發(fā)生機(jī)制的研究。CDX2作為腸道特異性轉(zhuǎn)錄因子，在維持腸上皮細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，其異常表達(dá)與多種腸道腫瘤（如結(jié)直腸癌）密切相關(guān)。

二、產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 高特異性：抗體經(jīng)嚴(yán)格驗(yàn)證，僅識(shí)別CDX2蛋白，與其他腸道相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2. 高靈敏度：適用于免疫組化（IHC）、免疫熒光（IF）、免疫沉淀（IP）及Western Blot（WB）等多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，可檢測(cè)低豐度CDX2表達(dá)。

3. 穩(wěn)定性強(qiáng)：抗體溶液采用Protein A/G親和層析純化，并添加50%甘油和0.02%疊氮鈉，確保長(zhǎng)期儲(chǔ)存（-20°C）下的活性。

4. 廣泛適用性：抗體可識(shí)別人、小鼠及大鼠來(lái)源的CDX2蛋白，適用于跨物種研究。

三、技術(shù)參數(shù)

• 抗體類(lèi)型：小鼠IgG2b亞型單克隆抗體

• 克隆號(hào)：4B9

• 免疫原：重組人CDX2蛋白（1-313氨基酸）

• 應(yīng)用稀釋比：

• WB：1:500 - 1:1000

• IF：1:50 - 1:200

• IP：1:20

• 儲(chǔ)存條件：短期（4°C）或長(zhǎng)期（-20°C）保存，避免反復(fù)凍融。

• 靶點(diǎn)特異性：僅識(shí)別CDX2蛋白，不與其他同源蛋白（如CDX1、CDX3）交叉反應(yīng)。

四、實(shí)驗(yàn)應(yīng)用指南

（一）免疫組化（IHC）

1. 樣本準(zhǔn)備：石蠟切片或冰凍切片，脫蠟至水化。

2. 抗原修復(fù)：使用pH 6.0檸檬酸鹽緩沖液進(jìn)行高壓修復(fù)或EDTA修復(fù)。

3. 抗體孵育：

• 一抗：稀釋至推薦濃度，4°C過(guò)夜或37°C孵育1小時(shí)。

• 二抗：HRP標(biāo)記抗小鼠IgG，37°C孵育30分鐘。

4. 顯色：DAB顯色液顯色，蘇木精復(fù)染，脫水封片。

5. 結(jié)果觀察：陽(yáng)性信號(hào)為細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)棕黃色染色。

（二）免疫熒光（IF）

1. 樣本準(zhǔn)備：細(xì)胞爬片或冰凍切片，4%多聚甲醛固定。

2. 抗體孵育：

• 一抗：稀釋至推薦濃度，4°C過(guò)夜。

• 二抗：Alexa Fluor 488/594標(biāo)記抗小鼠IgG，避光孵育1小時(shí)。

3. 核染色：DAPI染色5分鐘。

4. 封片：抗熒光淬滅封片劑封片，激光共聚焦顯微鏡觀察。

（三）Western Blot（WB）

1. 樣本準(zhǔn)備：組織或細(xì)胞裂解液，定量后上樣。

2. 轉(zhuǎn)膜：PVDF膜，100V恒壓轉(zhuǎn)膜1.5小時(shí)。

3. 抗體孵育：

• 一抗：稀釋至推薦濃度，4°C過(guò)夜。

• 二抗：HRP標(biāo)記抗小鼠IgG，室溫孵育1小時(shí)。

4. 顯影：ECL化學(xué)發(fā)光液顯影，Image Lab軟件分析。

五、質(zhì)量控制與驗(yàn)證

• 特異性驗(yàn)證：通過(guò)WB、IHC及IP實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)抗體僅識(shí)別CDX2蛋白，無(wú)其他非特異性條帶或信號(hào)。

• 批間一致性：不同批次抗體經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)控，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性。

• 參考文獻(xiàn)支持：抗體性能已發(fā)表于多篇高影響力期刊，支持其在腸道腫瘤研究中的應(yīng)用。

六、注意事項(xiàng)

1. 實(shí)驗(yàn)優(yōu)化：建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型和樣本類(lèi)型，預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化抗體稀釋比和孵育條件。

2. 安全操作：抗體溶液含疊氮鈉，避免接觸皮膚和黏膜，操作時(shí)佩戴手套和護(hù)目鏡。

3. 儲(chǔ)存條件：嚴(yán)格遵循-20°C保存要求，避免反復(fù)凍融。若需分裝，建議使用無(wú)菌離心管，-70°C長(zhǎng)期保存。

4. 僅限科研使用：本產(chǎn)品不可用于臨床診斷或治療。

七、常見(jiàn)問(wèn)題解答

1. Q：抗體出現(xiàn)沉淀是否影響使用？
   A： 輕微沉淀不影響活性，離心后取上清使用；若沉淀嚴(yán)重，請(qǐng)聯(lián)系供應(yīng)商。

2. Q：抗體是否支持多物種檢測(cè)？
   A： 本抗體可識(shí)別人、小鼠及大鼠CDX2蛋白，但需根據(jù)物種優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。

3. Q：抗體能否用于流式細(xì)胞術(shù)？
   A： 本產(chǎn)品未針對(duì)流式優(yōu)化，建議選擇專(zhuān)用流式抗體。