溫度對酶活性的影響：溫度是影響 TrypLE Express 酶保存的關鍵因素。該酶在室溫（15°C - 30°C）下可穩定保存 24 個月，2°C - 8°C 冷藏或 - 5°C - 20°C 冷凍保存同樣可行 。若保存溫度過高，如長時間處于超過 30°C 的環境，酶蛋白的空間結構會逐漸被破壞，發生變性。酶活性中心的結構改變，導致其無法與底物（細胞間及細胞與培養皿表面的連接肽鍵等）有效結合，從而降低消化能力。在這種情況下，使用保存不當的酶進行細胞消化，可能需要更長時間才能達到預期的解離效果，甚至無法充分解離細胞，影響后續實驗。而冷凍保存時，如果反復凍融，會使酶溶液中的冰晶反復形成和融化，破壞酶分子的結構，造成酶活性損失。例如，將原本冷凍保存的 TrypLE Express 酶頻繁取出解凍使用，再重新冷凍，幾次之后，酶的消化效率會明顯下降，細胞解離不充分，細胞活力也會受到影響 。

光照與濕度的潛在影響：雖然光照和濕度不像溫度那樣對 TrypLE Express 酶活性有直接的強烈影響，但也可能產生潛在作用。長時間暴露在強光下，酶溶液中的一些成分可能發生光化學反應，影響酶的穩定性。而高濕度環境，可能會使酶溶液吸收水分，導致其濃度發生變化，間接影響酶與底物的反應比例，進而影響消化效果。例如，在濕度較大的實驗室環境中，未密封好的酶試劑可能因吸收水分而稀釋，使得實際作用于細胞的酶濃度降低，消化時間延長，細胞解離效果不佳 。

保存期限與活性衰減：即使在適宜的保存條件下，隨著保存時間的推移，TrypLE Express 酶的活性也會逐漸衰減。這是由于酶分子自身的化學穩定性限制，即使在穩定的環境中，也會發生緩慢的降解反應。當使用接近保存期限的酶時，其活性可能已有所下降。此時，若仍按照原有的消化時間和濃度進行操作，可能無法達到理想的消化效果，需要適當增加酶濃度或延長消化時間。但這又可能增加對細胞的損傷風險，因此，科研人員需要根據酶的保存時間，合理評估和調整使用條件，以確保消化效果 。