Western Blot全流程優(yōu)化：伯樂(lè)預(yù)制膠與成像系統(tǒng)提升蛋白檢測(cè)效能

內(nèi)容簡(jiǎn)介：
本文全面審視了Western Blot（WB）技術(shù)的全流程，并詳細(xì)介紹了伯樂(lè)（Bio-Rad）如何通過(guò)其創(chuàng)新產(chǎn)品解決該傳統(tǒng)技術(shù)中的痛點(diǎn)。文章重點(diǎn)評(píng)價(jià)了Criterion™和Mini-PROTEAN®系列預(yù)制膠的均一性與便捷性，介紹了Trans-Blot® Turbo™轉(zhuǎn)印系統(tǒng)的高速高效轉(zhuǎn)印技術(shù)，并深入分析了ChemiDoc™ MP等化學(xué)發(fā)光/熒光成像系統(tǒng)的定量成像能力。旨在為從事蛋白質(zhì)表達(dá)分析的研究人員提供一套標(biāo)準(zhǔn)化、可重復(fù)且高效的WB整體解決方案，提升數(shù)據(jù)質(zhì)量與科研效率。

關(guān)鍵詞： Western Blot、預(yù)制膠、轉(zhuǎn)印系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像、定量蛋白質(zhì)分析

正文：

Western Blot（蛋白質(zhì)免疫印跡）作為檢測(cè)特定蛋白質(zhì)表達(dá)、分子量大小和翻譯后修飾的經(jīng)典技術(shù)，至今仍是分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)手段。然而，傳統(tǒng)的WB操作流程繁瑣、耗時(shí)且變量多，結(jié)果的可重復(fù)性和定量準(zhǔn)確性常常面臨挑戰(zhàn)。伯樂(lè)（Bio-Rad）針對(duì)WB的每一步驟——從電泳、轉(zhuǎn)膜到檢測(cè)成像——都提供了經(jīng)過(guò)優(yōu)化的產(chǎn)品和技術(shù)，旨在實(shí)現(xiàn)WB流程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化和精準(zhǔn)定量。

1. 電泳：預(yù)制膠的均一性革命
凝膠電泳是WB的第一步，其質(zhì)量直接影響后續(xù)結(jié)果。手工配制聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）存在批次間差異大、孔道易變形、重復(fù)性差等問(wèn)題。伯樂(lè)的Criterion™和Mini-PROTEAN®系列預(yù)制膠解決了這一痛點(diǎn)。這些預(yù)制膠在嚴(yán)格控制的條件下工業(yè)化生產(chǎn)，確保了的批間一致性和孔道均一性。研究者只需撕開(kāi)包裝，加入緩沖液和樣品即可上樣電泳，省時(shí)省力，并極大地減少了人為誤差和有毒單體丙烯酰胺的接觸風(fēng)險(xiǎn)。Criterion™系統(tǒng)更兼容26-well和18-well兩種規(guī)格的膠板，通量靈活，非常適合進(jìn)行多樣本間的平行比較。

2. 轉(zhuǎn)印：從“過(guò)夜慢轉(zhuǎn)"到“7分鐘快轉(zhuǎn)"
將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移至膜上（轉(zhuǎn)印）是WB的瓶頸步驟。傳統(tǒng)的濕轉(zhuǎn)法通常需要低電流條件下轉(zhuǎn)印數(shù)小時(shí)甚至過(guò)夜，效率低下。伯樂(lè)的Trans-Blot® Turbo™轉(zhuǎn)印系統(tǒng)采用了創(chuàng)新技術(shù)，通過(guò)優(yōu)化緩沖液、電場(chǎng)和轉(zhuǎn)印膜材料，實(shí)現(xiàn)了高效、快速的轉(zhuǎn)印。它可以在7-10分鐘內(nèi)完成標(biāo)準(zhǔn)尺寸凝膠的轉(zhuǎn)印過(guò)程，且轉(zhuǎn)印效率更高，尤其對(duì)大分子量蛋白的轉(zhuǎn)移優(yōu)于傳統(tǒng)方法。該系統(tǒng)大大縮短了WB的實(shí)驗(yàn)周期，并減少了蛋白在長(zhǎng)時(shí)間轉(zhuǎn)印中的擴(kuò)散和損失。

3. 檢測(cè)與成像：進(jìn)入精準(zhǔn)定量時(shí)代
傳統(tǒng)的WB檢測(cè)依賴于在暗室中壓X光片，這種方法動(dòng)態(tài)范圍窄、定量不準(zhǔn)確且操作不便。伯樂(lè)的ChemiDoc™ MP成像系統(tǒng)代表了WB檢測(cè)的現(xiàn)代化演進(jìn)。它是一款多功能成像儀，支持化學(xué)發(fā)光、熒光、比色法及染色應(yīng)用。

• 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)： 其高靈敏度CCD相機(jī)和自動(dòng)曝光功能能夠捕獲強(qiáng)度跨越數(shù)個(gè)數(shù)量級(jí)的信號(hào)，動(dòng)態(tài)范圍遠(yuǎn)超X光片，并可生成可用于定量的數(shù)字圖像文件。

• 熒光Western Blot： ChemiDoc MP系統(tǒng)支持IRDye®等近紅外熒光二抗。熒光WB無(wú)需底物孵育步驟，避免了酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)帶來(lái)的非線性問(wèn)題，線性動(dòng)態(tài)范圍更寬，允許多個(gè)目標(biāo)蛋白在同一張膜上同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)（多重免疫檢測(cè)），并進(jìn)行更精確的定量。伯樂(lè)也提供相應(yīng)的熒光標(biāo)記分子量標(biāo)準(zhǔn)和熒光總蛋白定量預(yù)染Marker，為標(biāo)準(zhǔn)化定量提供內(nèi)參。

此外，伯樂(lè)的Image Lab™軟件不僅用于采集圖像，更集成了強(qiáng)大的圖像分析和定量工具，可以自動(dòng)計(jì)算目標(biāo)條帶與內(nèi)參條帶的相對(duì)灰度值，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，最終生成符合發(fā)表要求的報(bào)告，極大地提升了WB數(shù)據(jù)的處理效率和可靠性。

WB實(shí)驗(yàn)的成功依賴于一系列高品質(zhì)耗材的穩(wěn)定供應(yīng)，從預(yù)制膠、電泳緩沖液、轉(zhuǎn)印膜、抗體到化學(xué)發(fā)光底物。任何環(huán)節(jié)的短缺都可能使精心準(zhǔn)備的樣本前功盡棄。

在科研單位領(lǐng)域，上海易匯生物提供試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù)，解決了科研單位 “緊急實(shí)驗(yàn)缺耗材、長(zhǎng)期需求難規(guī)劃" 的痛點(diǎn)。易匯生物的產(chǎn)品運(yùn)營(yíng)團(tuán)隊(duì)表示，其現(xiàn)貨試劑可實(shí)現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá)，期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能，保障實(shí)驗(yàn)進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。 這種高效的供應(yīng)鏈支持，確保了研究人員能夠及時(shí)獲得伯樂(lè)全線WB產(chǎn)品，從而保障了整個(gè)WB工作流程的穩(wěn)定運(yùn)行和數(shù)據(jù)產(chǎn)出的連續(xù)性。

綜上所述，伯樂(lè)通過(guò)提供從高品質(zhì)預(yù)制膠、高效轉(zhuǎn)印系統(tǒng)到智能成像分析的完整WB解決方案，系統(tǒng)地解決了傳統(tǒng)方法的諸多弊端，將WB從一項(xiàng)“藝術(shù)"轉(zhuǎn)變?yōu)榱烁煽俊⒏咝А⒏康默F(xiàn)代化蛋白質(zhì)分析技術(shù)。